Signosis SL-0032-FP 說明書

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signosis是一家專業(yè)從事生命科學領域細胞因子分析，轉(zhuǎn)錄因子分析等方面的生物技術(shù)公司，signosis經(jīng)過多年的發(fā)展，現(xiàn)已成為細胞因子行業(yè)品質(zhì)產(chǎn)品的象征。signosis主要產(chǎn)品涉及細胞因子分析，轉(zhuǎn)錄因子分析，細胞與細胞的凍，miRNA的研究，基因表達分析，蛋白質(zhì)相互作用分析，生物標志物分析等領域。signosis致力為客戶帶來更的產(chǎn)品與服務。

NFAT Luciferase Reporter Jurkat T Stable Cell Line

NFAT熒光素酶記錄Jurkat T穩(wěn)定細胞系

描述： 

NFAT響應性熒光素酶報告基因Jurkat T穩(wěn)定細胞系來自人T淋巴細胞，并在NFAT響應元件的控制下穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶報告基因。該細胞系是用于監(jiān)測由刺激治療，強制基因表達和基因敲除引發(fā)的鈣信號通路的激活的理想細胞模型。

原理

NFAT是轉(zhuǎn)錄因子家族，在免疫反應以及心臟，骨骼肌和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育中起重要作用。NFAT受鈣信號調(diào)節(jié)。通過磷酸酶鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的鈣激活，NFATc蛋白從細胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細胞核中，與其他蛋白質(zhì)配合以介導基因表達。NFAT的核進口被PKA和GSK3等激酶阻斷。NFATs也涉及乳腺癌。Signosis已經(jīng)建立了已經(jīng)用NFAT-熒光素酶報告基因構(gòu)建體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的NFAT熒光素酶報道細胞系。通過熒光素酶的分析，細胞系可用于監(jiān)測由刺激，復合治療，強制基因表達或基因敲低引發(fā)的NFAT活性的細胞變化。  

通過使用含有NFAT結(jié)合位點，螢火蟲熒光素酶編碼區(qū)上游的zui小啟動子以及潮霉素表達載體，然后潮霉素選擇的pTA-NFAT-熒光素酶報道載體轉(zhuǎn)染建立細胞系。隨后對潮霉素抗性克隆進行PMA +離子霉素誘導的熒光素酶活性篩選。

TF熒光素酶報告原理。  TF熒光素酶報道穩(wěn)定細胞株利用人工啟動子構(gòu)建體來驅(qū)動熒光素酶表達。啟動子區(qū)域可以由順式元件TF結(jié)合位點的多個重復序列，來自已知TF下游基因的啟動子區(qū)域的DNA片段或含有推定/已知的TF結(jié)合位點的DNA片段組成。TF可以通過細胞外刺激或通過細胞內(nèi)信號傳導途徑激活幾種方式。一旦激活，TF易位于細胞核，并經(jīng)常與相關因子相互作用以驅(qū)動基因表達。一旦熒光素酶表達，其可以在酶測定中產(chǎn)生光，并且測量的光量與TF活化的水平正相關。

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