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          Enzymatics L6060L 說明書

          更新時間:2018-04-11      點擊次數:3076

           

           

          貨號:L6060L

          品名:Taq DNA Ligase(Taq DNA連接酶)

          產品描述:

          使用NAD +作為輔因子,Taq DNA連接酶催化在含有相鄰5'-磷酰基和3'-羥基末端的雙鏈DNA中形成磷酸二酯鍵。

           

          規格:

          20,000 U

          濃度

          40,000 U/ml

          保存

          -25°C至-15°C

          純度(SDS-PAGE)

          > 99%

          活性:

          400,000 U/mg

          SS核酸外切酶

          400 U <5.0% released

          DS核酸外切酶

          400 U <1.0% released

          DS內切核酸酶

          400 U = No conversion

          大腸桿菌 DNA污染

          400 U <10 copies

           

          蛋白質來源

          重組大腸桿菌菌株攜帶Taq DNA連接酶基因的克隆。

           

          提供

           

          10 mM Tris-HCl
          50 mM KCl
          1 mM DTT
          0.1 mM EDTA
          0.1% Tween-20
          50% glycerol
          pH 7.5 @ 25°C

           

          隨附:


          B6060 (10X Taq DNA Ligase Buffer)

          10X Taq DNA Ligase Buffer (B6060)
          200 mM Tris-HCI
          250 mM KCl
          100 mM MgCl2
          5 mM NAD
          0.1% Triton X-100
          pH 7.6 @ 25°C

           

          單位定義 
          1單位定義為在50μl1X Taq DNA連接酶緩沖液中10分鐘后加入1μg用Sma I和Sal I切割的Lambda DNA的12個堿基粘性末端的50%所需的Taq DNA連接酶的量在45℃孵育。

           

          質量控制分析

           

          單位表征測定
          單位活性使用2倍系列稀釋法測量。在1X Taq DNA連接酶反應緩沖液中進行酶批次的稀釋并加入到50μL含有λHind III消化的DNA和1X Taq DNA連接酶反應緩沖液的反應中。將反應在45℃孵育10分鐘,停止,并在用溴化乙錠染色的0.8%瓊脂糖凝膠上分析。

           

          SDS-Page(物理純度評估)

          將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20%Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上,該凝膠側翼為寬范圍的MW標記和2.0μL的1:100稀釋的相同酶物種。電泳后,將凝膠染色并比較樣品以確定物理純度。該測試的驗收標準要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質條帶的質量,確認濃縮樣品的純度大于99%。

           

          污染測試

           

          單鏈核酸外切酶活性

          將含有10,000cpm放射性標記的單鏈DNA底物的50μL反應液和10μL在37℃下孵育4小時的酶溶液導致TCA可溶性計數的釋放小于5.0%。


          雙鏈核酸外切酶活性將含有5,000cpm放射性標記的雙鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μl反應液在37℃下溫育4小時,導致TCA可溶性計數的釋放少于1.0%。


          雙鏈核酸內切酶活性將含有0.5μgpENZuC DNA和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下溫育4小時,結果通過瓊脂糖凝膠電泳測定沒有肉眼可察覺地轉變為帶切口的環狀DNA。

           

          腸桿菌 16S rDNA污染測試
          重復5μL酶溶液樣品變性,并在TaqMan qPCR測定中篩選污染性大腸桿菌基因組DNA,使用對應于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測試的驗收標準是由3個重復的無模板對照樣品的平均值產生的閾值循環計數(C t)。基于無模板對照 Ct值和標準曲線數據之間的相關性,該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。

           

          部分產品信息:

          貨號

          品名

          規格

          濃度

          品牌

          N2070-10-L

           ATP Solution 

          50 µmol

          10 mM

          Enzymatics

          N2050-10-L

          10 mM dNTP Solution Mix

          100 µmol

          10 mM

          Enzymatics

          N2010L

          100 mM 75µmol dNTP Solution Set 

          75 µmol

          100 mM

          Enzymatics

          N2010-A-L

          100 mM dATP Solution 

          75 µmol

          100 mM

          Enzymatics

          N2050L

          100µmol dNTP Solution Mix 

          100 µmol

          25 mM

          Enzymatics

          Y9180L

          10x Uracil Cleavage System 

          750 Reactions

          N/A

          Enzymatics

          P7670

          2x HiFi PCR Master Mix 

          1 rxn

          2x

          Enzymatics

          Y9420L

          5x ER/A-Tailing Enzyme Mix 

          24 reactions

          N/A

          Enzymatics

          Y9380L

          E. coli Pyrophosphatase 

          50 U

          100 U/mL

          Enzymatics

          Y9030L

          E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein 

          1.5 mg

          2.75 mg/ml

          Enzymatics

          Y9140-HC-L

          End-Repair Mix (High Concentration) 

          75 Reactions

          1 Rxn/µL

          Enzymatics

          Y9140-LC-L

          End-Repair Mix (Low Concentration) 

          200 Reactions

          1 Rxn/µL

          Enzymatics

          Y9080L

          Endonuclease VIII 

          10,000 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

          P7600L

          EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) 

          10,000 U

          200,000 U/mL

          Enzymatics

          X8010L

          Exonuclease I 

          30,000 U

          20,000 U/ml

          Enzymatics

          X8020L

          Exonuclease III 

          50,000 U

          100,000 U/ml

          Enzymatics

          P7010-HC-L

          Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) 

          10,000 U

          50,000 U/ml

          Enzymatics

          P7010-LC-L

          Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) 

          10,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7060L

          Klenow Fragment 

          2,500 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          X8030L

          Lambda Exonuclease 

          10,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7040L

          M-MuLV Reverse Transcriptase 

          100,000 U

          200,000 U/ml

          Enzymatics

          P7090L

          Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) 

          3,000 U

          30,000 U/ml

          Enzymatics

          P7140-HC-L

          Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) 

          100,000 U

          400,000 U/ml

          Enzymatics

          P7140-LC-L

          Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) 

          100,000 U

          40,000 U/ml

          Enzymatics

          P7610L

          NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions 

          250 Reactions

          2X

          Enzymatics

          P7590L

          Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase 

          500 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7460L

          Poly(A) Polymerase 

          1,000 U

          5,000 U/mL

          Enzymatics

          Y9260L

          RecA 

          1.5 mg

          2.0 mg/mL

          Enzymatics

          Y9220L

          RNAse H 

          5,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          Y9240L

          RNAse Inhibitor 

          20,000 U

          40,000 U/ml

          Enzymatics

          L6010L

          T3 DNA Ligase 

          900,000 U

          3,000,000 U/ml

          Enzymatics

          L6030-LC-L

          T4 DNA Ligase 

          150,000 U

          120,000 U/ml

          Enzymatics

          L6030-HC-L

          T4 DNA Ligase (Rapid) 

          240,000 U

          600,000 U/ml

          Enzymatics

          P7080L

          T4 DNA Polymerase 

          2,000 U

          3,000 U/ml

          Enzymatics

          Y9130L

          T4 Gene 32 Protein 

          1.0 mg

          10 mg/mL

          Enzymatics

          Y9040L

          T4 Polynucleotide Kinase 

          10,000 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

          L6050L

          T4 RNA Ligase 1 

          10,000 U

          20,000 U/ml

          Enzymatics

          L6080L

          T4 RNA Ligase 2 

          4,500 U

          30,000 U/ml

          Enzymatics

          L6070L

          T4 RNA Ligase 2 Truncated 

          500 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          L6020L

          T7 DNA Ligase 

          900,000 U

          3,000,000 U/ml

          Enzymatics

          P7260L

          T7 DNA Polymerase 

          3,500 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

          P7180L

          T7 RNA Polymerase 

          50,000 U

          50,000 U/ml

          Enzymatics

          L6060L

          Taq DNA Ligase 

          20,000 U

          40,000 U/ml

          Enzymatics

          P7110L

          Taq DSC 2.0 DNA Polymerase 

          1,250 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7250L

          Taq-B DNA Polymerase 

          10,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7620L

          TaqIT 

          5,000 U

          50,000 U/mL

          Enzymatics

          P7070L

          Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) 

          6,000 U

          20,000 U/ml

          Enzymatics

          G5020L

          Thermolabile UDG 

          500 U

          1,000 U/ml

          Enzymatics

          Y9370L

          Thermostable Pyrophosphatase 

          1,250 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          G5010L

          Uracil DNA Glycosylase 

          10,000 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          P7511L

          VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase 

          500 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          P7520L

          VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase 

          500 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          L6030-W-L

          WGS Ligase 

          24 Reactions

          N/A

          Enzymatics

          P7640L

          ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit 

          1000 Reactions

          N/A

          Enzymatics

          P7020-HC-L

          φ29 DNA Polymerase (High Concentration) 

          2,000 U

          100,000 U/ml

          Enzymatics

          P7020-LC-L

          φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) 

          2,000 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

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