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          immuquest IQ213說明書

          更新時間:2019-02-27      點擊次數(shù):2228

          immuquest IQ213說明書

          Anti-hnRNP K antibody [3C2] - ChIP Grade

          抗hnRNP K抗體[3C2] - ChIP級

           

          目錄號:IQ213

          £226.00

           

          目標抗原

          hnRNP K. 

           

          主要說明

          小鼠抗hnRNP K [3C2] - ChIP等級

           

          目錄編號

          IQ213

           

          數(shù)量

          0.1毫升

           

          濃度

          1mg / ml的

           

          克隆

          3C2

           

          主辦

          老鼠 

           

          同型

          IgG2b的

           

          免疫原

          全長天然蛋白質(純化的)(人類)

           

          骨髓瘤/融合伴侶

          SP2 / 0

           

          物種反應性

          鼠標,大鼠,倉鼠,牛,人類,非洲爪蟾

           

          純化

          蛋白質A.

           

          格式

          純化的抗體(來自上清液)含有PBS 0.1%;Sodium azide

          應用

          WB,IP,ELISA,ICC / IF,流式細胞儀,ChIP /芯片,IHC(大鼠)

           

          稀釋液

          宜抗體稀釋應通過滴定確定,但作為指導嘗試;

          WB:1/1000。檢測到約65 kDa的條帶(預測分子量:51 kDa)

          流式細胞:使用1μg106個細胞

          ChIP /芯片:以分析依賴稀釋度使用。PubMed:20673990

           

          參考

          高R等人。異質核核糖核蛋白K(hnRNP-K)通過誘導參與細胞外基質,細胞運動和血管生成的基因來促進腫瘤轉移。J Biol Chem。2013年5月24日; 288(21):15046-56。doi:10.1074 / jbc.M113.466136。Epub 2013年4月5日.ICC   / IF;  人類PMID:23564449

          Marchand V等人。鑒定人免疫缺陷病毒1 tat / rev外顯子3的蛋白質配偶體導致發(fā)現(xiàn)新的HIV-1剪接調節(jié)因子蛋白質hnRNP K. RNA Biol。2011年3月至4月; 8(2):325-42。Epub 2011年3月1日  IP WB; 人類PMID:21368586

          Huarte M等。p53誘導的大型基因間非編碼RNA介導p53反應中的全基因抑制。Cell 142:409-419(2010)。芯片/芯片; 鼠標 PMID:20673990

          Chang JW等。hnRNP-K是TCR激活的ERK的核靶標,并且是T細胞晚期激活所必需的。Int Immunol。2009年12月; 21(12):1351-61。doi:10.1093 / intimm / dxp106。Epub 2009年10月30日.WB; 人類PMID:19880579 

          Enge M等人。p21和hnRNP K的MDM2依賴性下調提供了由藥理學活化的p53誘導的細胞凋亡和生長停滯之間的轉換。癌細胞。2009年3月3日; 15(3):171-83。doi:10.1016 / j.ccr.2009.01.019。 WB ChIP; 人類 PMID:19249676

          Fukuda T等。hnRNP K與RNA結合基序蛋白42相互作用,并在應激條件下維持細胞ATP水平。基因細胞。2009年2月; 14(2):113-28。doi:10.1111 / j.1365-2443.2008.01256.x。Epub 2008年1月6日  ICC / IF WB; 鼠標IP WB; 人類 PMID:19170760

          Schulz M等人。外周血單核細胞的蛋白質組學分析:在類風濕性關節(jié)炎患者中觀察到選擇性蛋白質加工。J Proteome Res。2007年9月; 6(9):3752-9。Epub 2007年8月17日  WB; 人類 PMID:17705417

          Guil S等人。多功能RNA結合蛋白hnRNP A1是miR-18a加工所必需的。Nat Struct Mol Biol。2007年7月; 14(7):591-6。Epub 2007年6月10日  WB; 人類  PMID:17558416 

          Inoue A等。隨機細胞內抗體的功能喪失篩查:鑒定hnRNP-K作為轉移的潛在靶標。Proc Natl Acad Sci US A. 2007 May 22; 104(21):8983-8。Epub 2007年5月4日  WB; 人類 PMID:17483488

          細胞類型特異性和發(fā)育調節(jié)異質核核糖核蛋白K mRNA在大鼠神經系統(tǒng)。Blanchette AR等。基因Expr模式。2006年8月; 6(6):596-606。Epub 2006 Feb 20  PMID:16488668

          格里菲斯BN等人。鑒定hnRNPs K,L和A2 / B1作為參與mRNA剪接的營養(yǎng)調節(jié)的候選蛋白。Biochim Biophys Acta。2006年11月至12月; 1759年(11-12):552-61。Epub 2006年10月6日  WB; 鼠標 PMID:17095106 

          Szeszel-Fedorowicz W等人。外顯子剪接沉默子參與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶mRNA的調節(jié)剪接。J Biol Chem。2006年11月10日; 281(45):34146-58。Epub 2006年9月15日  WB; 人類大鼠 PMID:16980303 

          Blanchette AR等。細胞類型特異性和發(fā)育調節(jié)異質核核糖核蛋白K mRNA在大鼠神經系統(tǒng)。基因Expr模式。2006年8月; 6(6):596-606。Epub 2006年2月20日  .IHC; 大鼠 PMID:16488668 

          Yano M等人。通過p21 mRNA轉錄后調控,參與Hu和異質核核糖核蛋白K在神經元分化中的作用。J Biol Chem。2005年4月1日; 280(13):12690-9。Epub 2005年1月25日  WB; 鼠標 PMID:15671036

          聚(C)結合異構核核糖核蛋白復合物K蛋白的表征和一級結構。Matunis M(Cell.Biol,1992年1月)  PMID:1729596

           

          數(shù)據(jù)庫鏈接

          Entrez Gene:528135牛

          Entrez Gene:3190 Human

          Entrez基因:15387鼠標

          Entrez基因:117282大鼠

          Omim:600712人類

          SwissProt:Q3T0D0牛

          SwissProt:P61978人類

          SwissProt:P61979鼠標

          SwissProt:P61980大鼠

          Unigene:522257人類

          Unigene:142872鼠標

          Unigene:11854鼠

           

          研究領域

          染色質; RNA結合;

           

          也稱為

          CSBP抗體; dC拉伸結合蛋白抗體; FLJ41122抗體;異種核核糖核蛋白K抗體; hnRNP K抗體; HNRNPK抗體; HNRPK抗體; HNRPK_HUMAN抗體;轉化上調核抗體;轉化上調核蛋白抗體;轉化上調核蛋白抗體;轉化上調的核蛋白抗體; TUNP抗體

           

           

          本產品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。

           

          異質核RNA(hnRNA)的微粒復合物是高Mr的RNA分子的異質混合物,其在蛋白質合成過程中在細胞核中發(fā)生,具有細胞特異性和異質性的蛋白質。蛋白質組分可能在加工過程中起作用。 hnRNA對mRNA的影響

           

          免疫熒光方案 - 甲醛固定

             1.從Tcunit收集細胞,并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
             2.用1x PBS洗滌并取出。
             3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預熱(37℃)對甲醛中孵育12分鐘。
             4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5%Triton X-100中孵育5分鐘。
             5.準備封閉試劑,這也是抗體稀釋劑。
             6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
             7.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
             8.準備一抗(50μl/蓋玻片)和濕潤染色室。
             9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并短暫風干。
            10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準備二抗。
            11.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數(shù))
            12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
            13.用1x PBS洗滌細胞5次。
            14.登上達皮。

          溶液(染色當天新鮮制備)。

              * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
              *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
              *固定液:3.5%對甲醛。

          1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應為7.4。完成體積,d.H20至25ml,加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


          免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

             1.從TCunit收集細胞,并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
             2.用1x PBS洗滌并取出。
             3.用冷甲醇:丙酮1:1在冰上固定細胞10分鐘。
             4.制備阻斷試劑,這也是抗體的稀釋劑。
             5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
             6.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
             7.準備一抗(50?l /蓋玻片)和濕染色室。
             8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并風干約7分鐘。
             9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時,在染色室中避光。在此期間準備二抗。
            10.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數(shù))
            11。在室溫下,在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
            12.用1x PBS洗滌細胞5次。
            13.登上達皮。

          溶液(染色當天新鮮制備)

              * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
              *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
              *固定液:甲醇:丙酮1:1冰冷。



          Western Blotting Protocol

             1.將凝膠轉移到PDVF或硝酸纖維素膜上
             2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
             3.在洗滌緩沖液中沖洗
             4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
             5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
             6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
             7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
             8.檢測(例如ECL,Amersham根據(jù)制造商的說明)

          洗滌緩沖液
          PBS + 0.1%Tween 20 

          阻斷緩沖液
          洗滌緩沖液+ 5%奶粉

          所用抗體的濃度取決于每種抗體,抗原的量和所用的檢測方法。通常,稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內,但通常必須憑經驗確定。

           

          研究領域
          染色質RNA結合
          研究
          表征聚(C)結合異質核核糖核蛋白復合物K蛋白的基本結構 - Matunis M通過p21 mRNA轉錄調控參與Hu和異質核核糖核蛋白K在神經元分化中的作用 - Masato Yano等

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