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          DNA污染去除酶說明書

          更新時間:2019-11-26      點擊次數(shù):2874

           

           

          DNA污染去除說明書

          英文名稱:HL-dsDNase

          中文名稱:熱敏雙鏈特異性核酸酶

          產(chǎn)地:挪威

          品牌:ArcticZymes

          應(yīng)用:去除RNA樣品中的基因組DNA污染

          儲存和運輸:-20度存儲 干冰運輸

          有效期:-20度3年

          單位定義:1單位指在25℃標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下,每分鐘OD260增加0.001(約每分鐘消化1pmol核酸底物)所需的酶量。

           

          簡介:制備RNA時基因組DNA污染將會干擾下游PCR或Northern Blot實驗。用RNase-free的DNase消化DNA也會導(dǎo)致RNA降解。熱敏雙鏈DNA特異性核酸酶(Heat labile ds-DNA-specific Nuclease,又名ezDNase或HL dsDNase),為雙鏈特異性核酸酶。其特異性的識別降解雙鏈DNA,對單鏈DNA或RNA幾乎無活性,其降解dsDNA的能力比ssDNA高~5000倍。除此外,該雙鏈DNA特異性核酸酶降解雙鏈DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍,因此特別適用于去除RNA樣品中的基因組DNA污染。該熱敏型雙鏈DNA核酸酶可將DNA降解為2~8bp的產(chǎn)物,且55℃ 5min可使該酶不可逆失活,同時又能保持RNA和ssDNA的穩(wěn)定性,因此產(chǎn)物無需再純化,可直接用于后續(xù)反應(yīng)。同時該酶與M-MLV和AMV的反應(yīng)Buffer都是兼容的,可應(yīng)用于反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中去除樣本中基因組DNA的污染,提高反轉(zhuǎn)錄效率。

           

          注意事項:

          (1)1×dsDNase Buffer:20mM Tris-HCl pH8, 2mM MgCl2。該酶需要1~3mM MgCl2。
          (2)該酶對DTT敏感,任何反應(yīng)體系中不得包含DTT。
          (3)通常在RT反應(yīng)中的用量為0.1~0.5U/20 μl體系。
          (4)任何濃度的SDS、鹽酸胍、β-mercaptoethanol或高鹽離子(>300mM)均抑制該酶活性。
          (5)該酶的宜反應(yīng)溫度為25~37℃,42℃ 30min后活性損失70%。

           

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          HL-dsDNase

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