ComplementTech C3 蛋白說明書

名稱： C3蛋白

編號： A113

規格： 250 µg/vial

濃度： 1.0 mg/mL (實際濃度見分析證書)

類型 冷凍液體

活動： >值為70%，與正常人血清標準相比 (見分析證書) 。

純度： >95%由SDS-PAGE

緩沖區： 10 mM磷酸鈉，145 mM氯化鈉，pH 7.2

消缺系數。 A280 nm在1.0 mg/mL時的=為1.03

分子量： 185000Da (2鏈)

防腐劑： 無，0.22µm過濾

存儲： - 7 0oC或以下。避免凍融 (>每次解凍活性損失10%) 。

根源 正常的人類血清 (經認證的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗體檢測均為陰性) 。

預防措施 在處理人體血液制品時要采取常規的預防措施。

一般說明

人類天然的C3是一種天然的糖基化 (~2.7%) 多肽，包含兩條二硫鍵連接的鏈 。C3是補體激活的所有三種途徑的激活的核心(Law，S。K.A.和里德，K。B. M. (1995)).每個途徑的起始都產生與目標表面結合的蛋白水解酶復合物 (C3轉化酶 ) 。這些酶在C3中切割一個肽鍵，釋放過敏性毒素C3a并激活C3b。在很短的一段時間 內 (~60µs) ，這種新生的C3b能夠與目標表面的羥基發生反應并共價偶聯。碳水化合 物是shou選的目標，但蛋白質的羥基和氨基也會發生反應。這種用C3b標記目標表面的過 程被稱為調理作用。新生C3b的反應位點是硫酯(Tack B。J.等人。 (1980); Pangburn M.K.和穆勒-EberhardH。J. (1980) )，C3b通過共價酯鍵與目標相連 (如果C3b附著在 氨基上，則形成酰胺鍵) 。大多數在補體激活過程中被激活的C3永遠不會附著在表面 ，因為它的硫酯與形成水的流體相C3b反應，而C3b被H和形成iC3b的因子迅速失活。表 面結合的C3b在所有三個途徑中對于有效激活C5和C5b-9復合物的形成都是必需的。表 面結合的C3b及其分解產物iC3b和C3d被淋巴細胞和吞噬細胞上的許多受體識別，這些 受體使用C3b配體刺激抗原呈遞給適應性免疫系統的細胞。最終的結果是目標特異性b 細胞和t細胞群體的擴大。

物理特性和結構

分子量：18.5萬道爾頓， 由兩條二硫鍵連接的鏈組成。阿爾法鏈是110000道爾 頓 (包含C3a和C3d域) ，測試鏈是75000道爾頓。阿爾法鏈和阿爾法鏈是通過一個二硫 鍵連接起來的。C3的pI約為。5.9

C3被C3轉化酶切割后，C3a (77個氨基酸片段，9083 Da) 從alpha鏈的n端釋 放出來，C3b (176,000 Da) 變成共價附著在活化劑表面的。C3和C3b的晶體衍生結構均已被描述(Gros，P。 (2008) ) ，這些結果表明，在C3a- C3b肽鍵被裂解后，C3的C3b部分發生了很大的構象變化。

天然的C3和C4在血漿中循環，通過分子內硫酯鍵連接其C3d或C4d結構域中的 甘氨酸和谷氨酰胺殘基。這些硫酯鍵容易受到氨、 甲胺、羥胺和聯胺等氨的親零攻擊 ，所有這些胺都已被用于滅活補體。

功能

C3對于有效的補體激活和隨后的抗原呈現給適應性免疫系統的細胞至關重要 (Lambris，J。D. (1988)).在識別目標補體后，被三種補體途徑中的一種激活，并在 目標表面形成酶 (C3轉化酶) 。這些酶 (C4b、C2a或C3b、Bb) 在阿爾法鏈的Arg 77后 切割C3，釋放過敏性毒素C3a并將C3b沉積在目標表面。雖然有一個非常弱的C3旁路系 統通過經典和凝集素途徑運作 (C4b，C2a可以在沒有C3b的情況下激活C3b的102000) ，C3b是有效C5激活所必需的(Rawal N。和潘伯恩M。K. (2003)).純化的c3對凍融極為敏感，在每個凍融循環中損失510%的活性。它對諸如-20 等中間溫度也很敏感oC.它在中等溫度下停留的時間越長，失去的活性就越多。幾個 小時oC可以wan全滅活它，即使它仍然被wan全凍結。