ACCUTASE 細胞消化液 AT104——上海起發(fā)現(xiàn)貨

細胞分離會影響體外培養(yǎng)細胞的表面蛋白和細胞表型，所以選擇合適的細胞分離方法是至關重要的。我們分離貼壁細胞常用的方法是蛋白酶消化，如胰酶消化，但是在胰酶消化的過程中大部分表面蛋白和細胞外基質成分都會受損，而且過度酶解不僅會影響表面marker的分析，還會降低細胞活力，尤其是干細胞的活力。因此，出現(xiàn)了這款胰酶替代物——Accutase。

Accutase是一種含有蛋白水解和膠原溶解酶的細胞分離溶液，而且這些酶既不是哺乳動物也不是細菌衍生的，因此它是不含任何動物或細菌來源的，是胰蛋白酶-EDTA消化液的替代品，可以應用于多種干細胞的培養(yǎng)及消化傳代、海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)、神經(jīng)干細胞培養(yǎng)等。由于Accutase較為溫和，分離后的細胞能保持完好的表面抗原，因此在分離細胞系以進行持續(xù)細胞培養(yǎng)、細胞表面標志物分析、病毒生長測定、細胞凋亡、細胞增殖和腫瘤細胞遷移測定方面非常有效。

1. 同時具備蛋白酶和溶膠原活性，適合大部分細胞的消化，應用范圍更為廣泛；

2. 消化更溫和，不會破壞細胞表面抗原，能夠維持細胞最大的活力；

3. 不需清洗或中和反應，加入培養(yǎng)基即可使Accutase酶失活，節(jié)省細胞傳代時間

產(chǎn)品描述

Accutase是包含有蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的替換產(chǎn)品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿和粘附培養(yǎng)器皿中消化細胞。適用于組織解離和細胞分離，因分離后的細胞能保持完好的表面抗原，且不含任何動物或者細菌來源組分，可滿足對后續(xù)如細胞表面標記、病毒生長分析、流式細胞分析以及生物反應器相關檢測等多種實驗的要求。

與傳統(tǒng)的胰酶消化液相比，本品具有以下優(yōu)勢：

1）適用于絕大多數(shù)原代細胞和哺乳動物細胞系的消化，以及昆蟲細胞；

2）溫和有效的消化干細胞（hESCs和mESCs），凍存后細胞具更高復蘇率；

3）幾分鐘內(nèi)實現(xiàn)粘附細胞的分離，不需清洗或中和反應，節(jié)省細胞傳代時間；

4）對細胞消化較為溫和，能增加細胞產(chǎn)量和存活率；增強細胞貼壁效率；改善細胞形態(tài)和細胞生長特性等。

本品為即用型的無菌產(chǎn)品，溶于Dulbecco’s PBS（含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚紅），比活力≥200 u/mL，可直接用于細胞培養(yǎng)相關實驗。

運輸和保存方法

冰袋運輸。收到后請于-20 ℃保存，有效期2年。2~8 ℃保存，有效期2個月。

注意事項

1）Accutase融化后4 ℃保存，至少2個月穩(wěn)定。不可室溫保存。也可分裝成單次用量，放到-80℃凍存，至少6個月穩(wěn)定。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3）本產(chǎn)品僅作科研用途！

使用方法

1. 4 ℃或冰浴融解Accutase，之后進行分裝保存。

【注】：不可37 ℃融化本品，否則會影響酶活。

2. 使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco's PBS潤洗細胞一次；

3. 以無菌操作的方式，按 75 cm2表面積加入10 mL的Accutase覆蓋貼壁細胞；

4. 重新放入37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)，消化5-10 min；

【注】：消化時間可自行調整。大部分細胞處于Accutase中高達1小時，對細胞狀態(tài)無影響。

5. 消化結束后，輕輕敲擊培養(yǎng)皿，使細胞與皿底部脫離，依照常規(guī)操作進行細胞計數(shù)和傳代。

【注】：不需另做清洗和酶活終止步驟。