美國ADS Biotec公司DNASep™ Cartridge – DNA Separation Column介紹

在分子生物學(xué)、基因組學(xué)以及精準(zhǔn)醫(yī)療等領(lǐng)域，對(duì)核酸（DNA和RNA）進(jìn)行高效、精準(zhǔn)的分離和分析是許多研究與應(yīng)用的基礎(chǔ)。DNASep™ Cartridge – DNA Separation Column（以下簡稱DNASep™色譜柱）正是為滿足這一需求而設(shè)計(jì)的一款高性能液相色譜（HPLC）專用分離柱。它以其分辨率、穩(wěn)定性和廣泛的適用性，成為眾多實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行核酸精細(xì)分析的工具之一。

??基礎(chǔ)信息

品牌： ADS Biotec。這是一家專注于為全球生命科學(xué)和醫(yī)療保健行業(yè)提供高質(zhì)量產(chǎn)品和服務(wù)的公司，以其在核酸純化和分析技術(shù)方面的專長而聞名。

品名： DNASep™ Cartridge – DNA Separation Column (DNA分離柱)。

貨號(hào)： DNA-99-3510

規(guī)格： 色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)尺寸為 4.6毫米 × 50毫米。其DNA負(fù)載能力為 2微克。

??技術(shù)原理：無孔聚合物與離子對(duì)反相色譜

要理解DNASep™色譜柱的優(yōu)勢(shì)，首先需要了解其核心工作原理。該產(chǎn)品結(jié)合了獨(dú)特的填料基質(zhì)和成熟的色譜技術(shù)。

1??創(chuàng)新的填料基質(zhì)：烷基化無孔聚苯乙烯-二乙烯基苯（PS-DVB）共聚物微球

與傳統(tǒng)硅膠基質(zhì)或多孔聚合物填料不同，DNASep™色譜柱采用了一種經(jīng)過烷基化處理的無孔PS-DVB共聚物微球作為固定相基質(zhì)。這一設(shè)計(jì)帶來了幾大關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)：

●傳質(zhì)速度快： 由于填料無孔，核酸分子僅在顆粒表面進(jìn)行相互作用，避免了進(jìn)入深孔內(nèi)部所需的漫長擴(kuò)散過程。這極大地縮短了分析時(shí)間，實(shí)現(xiàn)了快速分離。

●分辨率高： 無孔結(jié)構(gòu)消除了因孔深度差異導(dǎo)致的譜帶展寬效應(yīng)，使峰形更尖銳，從而能夠區(qū)分長度差異極小的核酸片段，例如僅相差一個(gè)堿基的寡核苷酸（n和n-1分離）。

●穩(wěn)定性好，壽命長： PS-DVB聚合物具備優(yōu)異的化學(xué)和物理穩(wěn)定性，能夠耐受高比例的有機(jī)溶劑、較寬的pH范圍以及高溫（最高可耐受95°C）。這使得色譜柱在苛刻的色譜條件下仍能保持性能，使用壽命長達(dá)數(shù)百次進(jìn)樣分析。

2??分離模式：離子對(duì)反相高效液相色譜（IP-RP-HPLC）

DNASep™色譜柱主要用于離子對(duì)反相液相色譜模式。其工作流程簡要概括如下：

●流動(dòng)相： 通常使用含有離子對(duì)試劑（如三乙基乙酸銨，TEAA或醋酸己銨，HAA）的乙腈-水溶液作為流動(dòng)相。

●分離機(jī)制： 離子對(duì)試劑（如TEAA）的疏水端與固定相的疏水表面結(jié)合，而帶正電的銨離子端則與帶負(fù)電的核酸磷酸骨架相互作用。在梯度洗脫過程中，隨著乙腈濃度的升高，疏水性較強(qiáng)的長片段核酸會(huì)較晚被洗脫，而短片段則先被洗脫。從而實(shí)現(xiàn)按核酸片段尺寸（大小） 進(jìn)行分離。

●關(guān)鍵特性： 這種方法的顯著優(yōu)點(diǎn)是，對(duì)雙鏈DNA（dsDNA）片段的尺寸分離在很大程度上與片段的堿基序列及其可能形成的二級(jí)結(jié)構(gòu)無關(guān)，結(jié)果更加穩(wěn)定和可靠。

? 解決的實(shí)驗(yàn)問題與應(yīng)用場(chǎng)景

DNASep™色譜柱的高分辨率和高通量特性，使其能夠解決核酸研究中多種復(fù)雜的分析難題。

? DNA片段尺寸分析與定量： 這是其最核心的應(yīng)用之一。無論是雙鏈DNA（dsDNA）還是單鏈DNA（ssDNA）/寡核苷酸（Oligo），該柱都能精確測(cè)定其片段大小分布，這對(duì)于克隆鑒定、PCR產(chǎn)物分析、下一代測(cè)序（NGS）文庫的質(zhì)量控制（QC）等至關(guān)重要。例如，在測(cè)序前對(duì)模板DNA進(jìn)行質(zhì)量控制，需要精確知道片段的大小和濃度。

? 基因突變檢測(cè)與基因分型： 基于dHPLC（變性高效液相色譜）原理，DNASep™色譜柱與WAVE™ dHPLC系統(tǒng)等平臺(tái)聯(lián)用，可高效檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性（SNP）和微小插入/缺失突變。通過部分變性的條件，能夠區(qū)分野生型和突變型DNA異源雙鏈分子，在遺傳病篩查、癌癥研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。其“是/否"檢測(cè)模式可以快速判斷特定基因型的存在。

? 核酸純度評(píng)估： 該柱能夠有效分離并檢測(cè)核酸樣品中的雜質(zhì)，如引物二聚體、失敗合成序列、酶反應(yīng)殘留物等，從而對(duì)DNA或寡核苷酸樣品的純度進(jìn)行精確評(píng)估。

? 片段回收與下游分析： 與破壞性強(qiáng)的凝膠電泳不同，經(jīng)HPLC分離后的核酸片段可以被完整地回收。這些高純度的片段可直接用于后續(xù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如靶標(biāo)驗(yàn)證、亞克隆、PCR擴(kuò)增、測(cè)序等，大大提高了研究效率。

?? 核心優(yōu)勢(shì)與市場(chǎng)競(jìng)爭力

綜合來看，DNASep™色譜柱的優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

1.優(yōu)異的性能： 具備出色的靈敏度、分辨率和重現(xiàn)性。其無孔填料技術(shù)確保了分析結(jié)果的高度準(zhǔn)確性。

2.耐用性： 由于其堅(jiān)固的聚合物基質(zhì)，該色譜柱使用壽命長，能夠耐受高溫和數(shù)百次分析運(yùn)行，顯著降低了單次分析的成本。

3.廣泛的兼容性： 這些多功能色譜柱不僅可與專用的WAVE™ dHPLC系統(tǒng)配合使用，也適用于其他多種品牌的HPLC系統(tǒng)，為用戶提供了極大的靈活性。

4.成熟的技術(shù)與認(rèn)可： 該產(chǎn)品擁有數(shù)以百計(jì)的文獻(xiàn)參考資料，證明了其在全球眾多科研實(shí)驗(yàn)室中的廣泛應(yīng)用和可靠性。ADS Biotec也提供了嚴(yán)格的質(zhì)量控制和完善的技術(shù)支持。

?? 客戶群體與訂貨信息

1.目標(biāo)客戶群體：

DNASep™色譜柱主要服務(wù)于以下類型的機(jī)構(gòu)和用戶：

●生物醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)與大學(xué)實(shí)驗(yàn)室： 從事基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究的科研人員。

●臨床診斷實(shí)驗(yàn)室： 開展遺傳病診斷、腫瘤基因突變檢測(cè)等分子檢測(cè)項(xiàng)目的醫(yī)療機(jī)構(gòu)。

●制藥公司與生物技術(shù)公司： 在進(jìn)行藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)、生物標(biāo)志物驗(yàn)證、以及治療性寡核苷酸藥物的研發(fā)與質(zhì)控過程中需要高精度核酸分析工具的企業(yè)。

●合同研究組織（CROs）： 為上述客戶提供研發(fā)或檢測(cè)服務(wù)的機(jī)構(gòu)，需要穩(wěn)定可靠的平臺(tái)技術(shù)。

2.訂貨信息與相關(guān)產(chǎn)品：

●主產(chǎn)品： 核心產(chǎn)品貨號(hào)為 DNA-99-3510（分析型，4.6 x 50 mm）。ADS Biotec還提供其他型號(hào)以滿足不同需求，例如通量更高的 DNA-99-3710（DNASep™ HT Cartridge, 6.5 x 37 mm）以及用于RNA工作的 RNA-99-3810（RNASep Prep）和用于寡核苷酸分析的 NUC-99-3550（OligoSep™ Cartridge）等。

●配套試劑： 為獲得最佳分離效果，需要搭配專用的緩沖液，如三乙基乙酸銨（TEAA）溶液（貨號(hào)SP5890等）和醋酸己銨（HAA）溶液（貨號(hào)SP5892等），以及相應(yīng)的緩沖液A和B（貨號(hào)553421, 553422, 553424, 553425等）。

●采購渠道： 在中國市場(chǎng)，用戶可以通過ADS Bitec的授權(quán)代理商（如上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司）進(jìn)行咨詢和采購。具體價(jià)格需聯(lián)系代理商獲取。

??總結(jié)

DNASep™ Cartridge（DNA-99-3510）是一款基于先進(jìn)無孔PS-DVB聚合物填料技術(shù)的高性能核酸分離柱。它通過離子對(duì)反相液相色譜技術(shù)，為科研和臨床工作者提供了快速、精準(zhǔn)、可靠的DNA/RNA尺寸分析、突變檢測(cè)、純度評(píng)估解決方案。其耐用性、高分辨率以及與多種HPLC系統(tǒng)的廣泛兼容性，使其在生命科學(xué)和分子診斷領(lǐng)域占據(jù)了重要地位，是進(jìn)行高水平核酸研究的得力工具。

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