CANDOR LowCross-Buffer®產(chǎn)品指導(dǎo)

問題一：

在過氧化物標(biāo)記的雙夾心elisa實驗中得到的背景值較高，原因是什么？LowCross-Buffer®能起到什么作用嗎？

答復(fù)：

了解二抗能否與其他哺乳動物的抗體結(jié)合是非常重要的。除非是高度純化的抗體，抗兔lgG的二抗也能夠與鼠lgG，山羊lgG結(jié)合，原因是哺乳動物抗體的高 度同源性，不經(jīng)過純化（預(yù)吸附）的二抗可以與其他抗體進(jìn)行高親和性的交叉反應(yīng)，這種情況下，LowCross-Buffer起不到作用，二抗必須不能與捕 獲抗體結(jié)合，例如，Biotrend可以提供各類避免此類交叉反應(yīng)的預(yù)吸附抗體。

問題二：

我需要對LowCross-Buffer®進(jìn)行稀釋嗎？

答復(fù)：

是即用型的。樣品或檢測抗體直接用此稀釋，僅僅在競爭性實驗或一些免疫組化實驗中，可以用水或一些生理緩沖液對其進(jìn)行稀釋。在這種情況下，實驗者要通過測試找到合適的比例。

問題三：

LowCross-Buffer®會對酶標(biāo)檢測的顯色反應(yīng)產(chǎn)生影響嗎？

答復(fù)：

LowCross-Buffer®不會使堿性磷酸酶或過氧化物酶活性減弱。

有的用戶把酶標(biāo)檢測抗體在LowCross-Buffer®孵育后會檢測到酶活性的增強(qiáng)。

問題四：

LowCross Buffer®能用在熒光物質(zhì)結(jié)合物中嗎？比如在蛋白芯片實驗中。

答復(fù)：

是的，可以用在蛋白芯片中。對于青染料（如Cy5, Cy3，），有的實驗中可觀察到熒光量的增強(qiáng)。

問題五：

可以用于抗體或多克隆抗體嗎

答復(fù)：

可以，不過在使用多抗時，要注意到多抗中含有親和力不同的多種抗體，LowCross-Buffer®僅允許高親和性的抗體結(jié)合而消除低親和性的結(jié)合。使 用LowCross-Buffer®時可適當(dāng)增加多抗的濃度，因為抗體濃度的增加也是高親和性抗體濃度的增加，同時LowCross-Buffer®抑制 低親和性結(jié)合。但是不是要加大抗體的濃度還要取決于抗體的純度。

問題六：

LowCross-Buffer®可以反復(fù)凍融嗎？

答復(fù)：

反復(fù)凍融幾次不會有影響，但是在使用前要充分混勻。

問題七：

為什么LowCross-Buffer®能減少交叉反應(yīng)？

答復(fù)：

我們所說的基質(zhì)效應(yīng)一般是一些基質(zhì)成分（如人血清標(biāo)本中的血清蛋白）的與分析物或抗體的低親和性結(jié)合。分析物會被標(biāo)本中的蛋白或其他成分掩蔽掉而不能與抗體結(jié)合，抗體也可以被基質(zhì)掩蔽。LowCross-Buffer®可以減少基質(zhì)對抗體的掩蔽。

問題八：

LowCross-Buffer®可以用在哪些方面？

答復(fù)：LowCross-Buffer®是一種新的用于免疫實驗（如ELISA、WB、蛋白芯片和免疫-PCR）的樣本緩沖液，有助于減少干擾作用，如非特異性結(jié)合，交叉反應(yīng)和基質(zhì)效應(yīng)，抗原抗體的高親和結(jié)合不會被減弱。

問題九

LowCross-Buffer®能替代表面封閉液嗎？

答復(fù):

不行，LowCross-Buffer®不是表面封閉液，你可以用它稀釋樣本和抗體，我們推薦使用CANDOR的封閉液，能起到很好的封閉作用。