Phosphatidylinositol Trisphosphate ELISA Kit

??產(chǎn)品基礎(chǔ)信息  

- 貨號：EK1F700  

- 英文名：Phosphatidylinositol Trisphosphate (PIP3) ELISA Kit-Competitive  

- 中文名：磷脂酰肌醇三磷酸（PIP3）ELISA試劑盒-競爭法  

- 品牌：Biovenic生物公司  

- 規(guī)格：96孔板（含預(yù)包被抗體、標準品、酶標二抗、底物A/B、終止液、洗滌液等）  

- 檢測范圍：0.1–100 ng/mL（具體以說明書為準）  

- 適用樣本：血清、血漿、細胞裂解液、組織勻漿液等  

- 靈敏度：<5 pg/mL（典型值）  

- 應(yīng)用領(lǐng)域：癌癥研究、炎癥性疾病、代謝調(diào)控、藥物開發(fā)等  

??詳細介紹  

1. 產(chǎn)品原理與技術(shù)特點  

競爭性ELISA技術(shù)：  

該Phosphatidylinositol Trisphosphate ELISA Kit基于競爭性ELISA原理，樣本中的PIP3與酶標PIP3競爭結(jié)合預(yù)包被的特異性抗體。通過檢測底物顯色反應(yīng)的吸光度值，定量分析樣本中PIP3濃度。相較于傳統(tǒng)夾心法，競爭法更適合低豐度或小分子目標物的檢測，顯著降低交叉反應(yīng)風險。  

核心技術(shù)優(yōu)勢：  

- 單克隆抗體：采用高親和力單抗，確保特異性識別PIP3的特定磷酸化位點（如PI(3,4,5)P3）。  

- 寬動態(tài)范圍：線性檢測范圍覆蓋0.1–100 ng/mL，可滿足不同實驗需求。  

- 抗干擾設(shè)計：優(yōu)化緩沖體系，減少脂類、蛋白聚集體等復雜樣本基質(zhì)的干擾。  

2. 核心應(yīng)用場景  

- 癌癥研究：PIP3是PI3K/AKT/mTOR通路的關(guān)鍵信號分子，與腫瘤增殖、遷移密切相關(guān)。適用于癌癥細胞系、腫瘤組織樣本的信號通路分析。  

- 炎癥與免疫調(diào)控：檢測巨噬細胞、T細胞等免疫細胞中PIP3水平，研究炎癥反應(yīng)機制。  

- 代謝性疾病：胰島素抵抗、肥胖等代謝異常與PIP3信號失調(diào)相關(guān)，可用于代謝組學研究。  

- 藥物開發(fā)：評估PI3K抑制劑或激活劑的藥效，監(jiān)測治療過程中PIP3動態(tài)變化。  

3. 實驗流程與操作便捷性  

標準實驗步驟：  

1. 樣本處理：血清/血漿樣本需離心去除脂質(zhì)，細胞裂解液需勻漿后超聲破碎。  

2. 標準曲線建立：使用梯度稀釋的PIP3標準品（0.1–100 ng/mL）繪制吸光度-濃度曲線。  

3. 樣本檢測：每孔加入樣本或標準品，與酶標PIP3競爭結(jié)合抗體，洗板后加入底物顯色。  

4. 數(shù)據(jù)分析：通過軟件（如GraphPad Prism）計算樣本濃度，評估實驗重復性（CV<15%）。  

操作亮點：  

- 預(yù)包被板：即用型96孔板，省去抗體包被步驟，縮短實驗時間。  

- 全封閉體系：減少操作污染風險，適合高通量檢測。  

- 兼容性廣：支持手動或自動化液體處理系統(tǒng)（如Biomek i7）。  

??核心優(yōu)勢詳解  

1. 超高靈敏度與精準度  

- 檢測限低至5 pg/mL：可檢測極低濃度的PIP3，適用于微量樣本（如單細胞裂解液）。  

- 回收率>90%：通過添加已知濃度標準品驗證，確保結(jié)果可靠性。  

- 批間差異<10%：嚴格質(zhì)控生產(chǎn)流程，保障不同批次試劑盒性能一致。  

2. 嚴格的質(zhì)控標準  

- 交叉反應(yīng)測試：與PI(4,5)P2、PI(3,4)P2等類似物無顯著交叉反應(yīng)（<2%）。  

- 穩(wěn)定性驗證：4℃保存6個月，活性保持>95%；37℃加速老化7天，性能偏差<10%。  

- 重復性實驗：同一樣本重復檢測10次，CV值≤8%。  

3. 人性化設(shè)計  

- 即用型試劑：預(yù)混底物A/B、終止液，避免手動配制誤差。  

- 詳細說明書：附實驗流程圖、常見問題解答（FAQ）及參考文獻。  

- 環(huán)保包裝：采用可降解材料，減少實驗室廢棄物污染。  

?購買常見問題與解答  

Q1：該試劑盒是否支持人以外的物種樣本？  

A：本Phosphatidylinositol Trisphosphate ELISA Kit針對人源PIP3優(yōu)化，但經(jīng)驗證可兼容小鼠、大鼠樣本（需稀釋后使用）。其他物種建議先進行預(yù)實驗。  

Q2：樣本處理中如何避免PIP3降解？  

A：建議添加蛋白酶抑制劑（如PMSF），并在冰上操作。細胞裂解后需立即離心（4℃, 12,000 rpm, 10 min），取上清檢測。  

Q3：檢測高濃度樣本時如何操作？  

A：若樣本濃度超過標準曲線上限（100 ng/mL），需稀釋后檢測。推薦使用本試劑盒提供的稀釋液進行梯度稀釋。  

Q4：顯色后顏色不均勻怎么辦？  

A：可能因洗板不好或底物混合不均導致。建議增加洗板次數(shù)（5次，每次30秒），并充分混勻底物A/B后再加入孔中。  

Q5：試劑盒有效期多久？  

A：未開封試劑盒有效期為12個月（自生產(chǎn)日起）。開封后建議30天內(nèi)用完，并避光保存于2–8℃。  

Q6：能否用于臨床診斷？  

A：本產(chǎn)品為科研用途（RUO），不可直接用于臨床診斷。臨床檢測需通過醫(yī)療器械認證。  

Q7：靈敏度是否受樣本基質(zhì)影響？  

A：已通過多種樣本基質(zhì)（血清、血漿、細胞裂解液）驗證，靈敏度穩(wěn)定。但高脂血癥樣本需預(yù)先脫脂處理。  

Q8：是否提供技術(shù)支持？  

A：Biovenic提供全程技術(shù)支持，包括實驗設(shè)計、數(shù)據(jù)分析及問題解答。  

Q9：與其他品牌ELISA試劑盒相比有何優(yōu)勢？  

A：Biovenic采用競爭性ELISA技術(shù)，特異性更高；同時提供更寬的動態(tài)范圍和更低的檢測限，性價比突出。  

Q10：能否檢測磷酸酶處理后的樣本？  

A：若樣本經(jīng)磷酸酶處理（如去磷酸化），PIP3會被降解為IP3，導致檢測結(jié)果偏低。建議設(shè)置陽性對照驗證。

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