Fast Pfu DNA 聚合酶

· 制品內(nèi)容 （250 U）

· 制品說明
Pfu DNA聚合酶為zui常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反應(yīng)中廣范使用,然而Pfu酶擴(kuò)增靈敏度不高，延伸速度緩慢（0.5kb/分鐘）給眾多的使用者帶來了不便。針對普通Pfu酶的以上缺點(diǎn)，SinoBio采用分子進(jìn)化技術(shù)對普通Pfu酶進(jìn)行改造，制備的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高靈敏度、抗干擾能力強(qiáng)等特點(diǎn)，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能獲得更理想的擴(kuò)增結(jié)果，并大幅度縮短擴(kuò)增反應(yīng)時間。

· 用 途
用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng)，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等（參見 SinoBio 實驗方案）。

· 產(chǎn)品特點(diǎn)
高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，為普通Taq酶的10倍。
快速：Fast Pfu擴(kuò)增速度為普通Pfu酶的數(shù)倍，72℃保溫30秒可延伸1kb以上。
高效：以λDNA為模板，擴(kuò)增長度可達(dá)12kb，能高效擴(kuò)增≤6kb片段；對于人基因組DNA等復(fù)雜模板，能有效擴(kuò)增出3kb特定基因片段。
*配方的5×Buffer：使PCR擴(kuò)增反應(yīng)更加穩(wěn)定、靈敏、高效。

· 質(zhì)量保證
經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶；PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留，無核酸內(nèi)、外切酶污染。

· 使用建議

Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端，無3’端"A"突出， 其PCR產(chǎn)物的克隆有兩種方案：
1.PCR前引物進(jìn)行5’端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中（參見 Sinobio 實驗方案）。
2.將產(chǎn)物3’末端加A后再與T-Vector連接（參見 SinoBio 實驗方案）。

*由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計引物時應(yīng)適當(dāng)增加引物的長度，理想的引物長度為 20-30堿基。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解， 盡量在冰上配置反應(yīng)體系，并zui后加入Fast Pfu酶。。

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· 其他說明